transparent gif


Ej inloggad.

Göteborgs universitets publikationer

Efficient Isotope Editing of Proteins for Site-Directed Vibrational Spectroscopy

Författare och institution:
Sebastian Peuker (Institutionen för kemi och molekylärbiologi); Hanna Andersson (Institutionen för kemi och molekylärbiologi); Emil Gustavsson (Institutionen för kemi och molekylärbiologi); K. S. Maiti (Institutionen för kemi och molekylärbiologi); R Kania (Institutionen för kemi och molekylärbiologi); Alavi Karim (Institutionen för kemi och molekylärbiologi); Stephan Niebling (Institutionen för kemi och molekylärbiologi); Anders Pedersen (Svenskt NMR-centrum vid Göteborgs universitet); Mate Erdelyi (Institutionen för kemi och molekylärbiologi); Sebastian Westenhoff (Institutionen för kemi och molekylärbiologi)
Publicerad i:
Journal of the American Chemical Society, 138 ( 7 ) s. 2312-2318
Artikel, refereegranskad vetenskaplig
Sammanfattning (abstract):
Vibrational spectra contain unique information on protein structure and dynamics. However, this information is often obscured by spectral congestion, and site-selective information is not available. In principle, sites of interest can be spectrally identified by isotope shifts, but site-specific isotope labeling of proteins is today possible only for favorable amino acids or with prohibitively low yields. Here we present an efficient cell-free expression system for the site-specific incorporation of any isotope-labeled amino acid into proteins. We synthesized 1.6 mg of green fluorescent protein with an isotope-labeled tyrosine from 100 mL of cell free reaction extract. We unambiguously identified spectral features of the tyrosine in the fingerprint region of the time-resolved infrared absorption spectra. Kinetic analysis confirmed the existence of an intermediate state between photoexcitation and proton transfer that lives for 3 ps. Our method lifts vibrational spectroscopy of proteins to a higher level of structural specificity.
Ämne (baseras på Högskoleverkets indelning av forskningsämnen):
Biologiska vetenskaper ->
Biokemi och molekylärbiologi
green fluorescent protein, 2-dimensional infrared-spectroscopy, unnatural amino-acids, proton-transfer, chemical aminoacylation, transfer-rnas, genetic-code, active-site, dynamics, expression, Chemistry
Postens nummer:
Posten skapad:
2016-03-18 14:33

Visa i Endnote-format

Göteborgs universitet • Tel. 031-786 0000
© Göteborgs universitet 2007